3. 使用鈣離子載體A23187
鈣離子載體 A23187(ionophore A23187)能直接誘發(fā) Ca2+ 進(jìn)入精子細(xì)胞內(nèi),提高細(xì)胞內(nèi)的ca2+ 濃度,從而導(dǎo)致精子的獲能。因此,A23187被廣泛用于精子的獲能處理。值得注意的是,要控制A23187的工作濃度和作用時(shí)間,否則會(huì)導(dǎo)致精子的活力下降和死亡。
4. 使用肝素
肝素是一種高度硫酸化的氨基酸多糖類化合物,當(dāng)它與精子結(jié)合后,能引起 Ca2+ 進(jìn)入精子細(xì)胞內(nèi)部而導(dǎo)致精子的獲能(First and Parrish,1988)。 研究發(fā)現(xiàn),對(duì)體外受精結(jié)果起關(guān)鍵作用的是受精液中的肝素濃度。因此,現(xiàn)省去了肝素預(yù)先獲能處理這一步,直接將肝素(50mg/L)添加到受精液中進(jìn)行受精。
總之,精子的獲能是諸多因素綜合作用的結(jié)果,任何導(dǎo)致精子質(zhì)膜穩(wěn)定性下降和 Ca2+ 內(nèi)的操作均有可能引起精子的獲能,上述獲能處理方法只不過在一定程度上起到精子獲能的主導(dǎo)作用。如精子的冷凍保存,將可能去掉精子的被膜蛋白,使精子質(zhì)膜的穩(wěn)定性下降,制冷凍保存的精子容易獲能,其體外受精的效果亦較好,且不經(jīng)任何獲能處理亦能受精卵母細(xì)胞。當(dāng)在受精液中添加一定濃度的肝素時(shí),則能進(jìn)一步提高精子的體外受精效果。