計數(shù)：

將細(xì)胞計數(shù)板和蓋玻片清洗干凈，并用擦鏡紙吸去表面的水滴。

把蓋玻片蓋在細(xì)胞計數(shù)板的計數(shù)區(qū)域。

將細(xì)胞按傳代方法懸浮，反復(fù)吹打細(xì)胞懸浮液使細(xì)胞分散均。取15微升左右的細(xì)胞懸浮液加入細(xì)胞從蓋玻片和細(xì)胞板貼合的邊緣加入，使其慢慢充滿蓋玻片與細(xì)胞板之間的空隙，注意不要留有氣泡。

把細(xì)胞計數(shù)板放至顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。細(xì)胞計數(shù)板有上下兩個區(qū)域，每個區(qū)域包含9個大格，每個大格又被劃分為16個小格。選取一個大格，計數(shù)格中的細(xì)胞總數(shù)。壓線的細(xì)胞只算上側(cè)和左側(cè)，不算右側(cè)和下側(cè)。每個大格的體積是0.1μl，換算可得懸浮液的細(xì)胞濃度。

鋪板（以24孔板為例）：

在24孔板每個板中加入0.5ml完全培養(yǎng)基。

將細(xì)胞懸浮液稀釋至6×105個細(xì)胞/ml，然后用1ml的槍吸取0.5ml細(xì)胞，將手抬高至槍頭離細(xì)胞板3到4cm，緩慢的逐滴滴入孔中。滴液過程注意對準(zhǔn)同一個孔的不同位置，以便讓細(xì)胞分散得更均勻。

每滴完一個孔后，應(yīng)該蓋上24孔板，將整個板在超凈臺平面，水平的前后左右的輕微振蕩一下。注意不能把細(xì)胞液振到板蓋或板子外面。

將接種好的24孔板放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。每個孔加入3×105個細(xì)胞，是使24孔板經(jīng)過12小時培養(yǎng)就可以蓋滿整個底面的細(xì)胞數(shù)量，根據(jù)實驗的不同要求，可以調(diào)整加入的細(xì)胞量。其他孔板按照底面積換算。