環(huán)境：細(xì)胞培養(yǎng)需要?jiǎng)?chuàng)造一個(gè)盡量無菌的環(huán)境，所以基本要求是一間密閉的帶有空氣凈化系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室要安裝能夠進(jìn)行表面殺菌的紫外燈，一般裝置在室內(nèi)頂部，與日光燈分開控制。

設(shè)備：一般的細(xì)胞培養(yǎng)需要二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱，達(dá)到細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作要求的超凈臺，倒置顯微鏡，液氮罐，冰箱，水浴鍋，離心機(jī)，微量移液器等。

耗材：基本的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)耗材包括酒精燈、脫脂棉花、封口膠、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞培養(yǎng)皿、移液管、 50ml離心管等。耗材可以購買細(xì)胞培養(yǎng)專用的一次性耗材，也可使用長久性的玻璃器皿。但是如果是使用長久性的玻璃器皿，必須將其用牛皮紙包裹好，然后經(jīng)過濕熱高壓滅菌和滅菌后烘干。牛皮紙?jiān)诜胚M(jìn)超凈臺時(shí)才能拆除。

試劑：根據(jù)培養(yǎng)的細(xì)胞種類的不同，需要的試劑也不同。基本要求包括培養(yǎng)的細(xì)胞對應(yīng)的培養(yǎng)液，胎牛血清，L谷氨酸，雙抗（青霉素和鏈霉素），0.25% 胰酶以及PBS。

試劑可以通過生物公司訂購，其中雙抗、胰酶和PBS也可以自行購買原料配制。1、配制雙抗時(shí)要用滅過菌的雙蒸水，用一次性無菌注射器進(jìn)行配制，整個(gè)配制過程要在超凈臺內(nèi)操作。

配制胰酶時(shí)要使用滅菌后的雙蒸水，配制好可以用帶0.22微米微孔濾膜的過濾器進(jìn)行過濾滅菌，整個(gè)過濾滅菌過程要在超凈臺內(nèi)操作。

配制PBS可以使用不滅菌的雙蒸水，配制完成后再經(jīng)過濕熱滅菌。

部分試劑的配方

100×L谷氨酸：L谷氨酰胺0.2M

10×PBS：1000ml中含NaCl 8.5g，Na2HPO4.12H2O 30.8g，NaH2PO4.2H2O 2.8g

100×雙抗：青霉素10000U/ml，鏈霉素10000ug/ml

胰酶：0.25%胰酶，0.03EDTA

細(xì)胞完全培養(yǎng)液的配置

細(xì)胞完全培養(yǎng)液，以293細(xì)胞為例，需要含10%胎牛血清、2mmol/L的L谷氨酸的DMEM培養(yǎng)液。

配置好的DMEM培養(yǎng)液，根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求的不同，選擇是否加入雙抗。雙抗終濃度為100單位/ml。