實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳質(zhì)量控制主要包括兩個(gè)方面內(nèi)容 : 一是科學(xué)地進(jìn)行引種、繁殖和生產(chǎn) , 即 對生產(chǎn)過程進(jìn)行控制 ; 二是建立定期的遺傳監(jiān)測制度 , 對產(chǎn)品的質(zhì)量進(jìn)行控制。遺傳質(zhì)量控制的重點(diǎn)是近交系和封閉群動(dòng)物。
( 一 ) 遺傳監(jiān)測的主要方法
從理論上講 , 凡是由遺傳決定的動(dòng)物性狀都可能成為遺傳監(jiān)測的指標(biāo)。但是考慮到性狀的穩(wěn)定性以及監(jiān)測方法的準(zhǔn)確和方便 , 研究者逐漸建立了一些遺傳監(jiān)測的常規(guī)方法。因?yàn)槊?種方法只涉及到基因組內(nèi)有限的一部分位點(diǎn) , 所以需要幾種方法同時(shí)使用 , 才能對品系的遺傳組成有全面地了解。常用的方法有 :
(1) 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 ( 監(jiān)測生長發(fā)育、繁殖性狀參數(shù)等 ): 體重 , 體長 , 窩產(chǎn)仔數(shù) , 離乳數(shù)等 ;
(2) 免疫學(xué)方法 ( 監(jiān)測免疫標(biāo)志 ): 皮膚移植法 , 混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)法 , 腫瘤移植法 , 血清反應(yīng)法等 ;
(3) 生物化學(xué)方法 ( 監(jiān)測生化標(biāo)記 ): 通過電泳檢測各種同工酶如脂酶、過氧化氫酶等生化標(biāo)記 ;
(4) 形態(tài)學(xué)方法 ( 監(jiān)測外形特征 ): 毛色基因測試法 , 下領(lǐng)骨測定法等 ;
(5) 細(xì)胞遺傳學(xué)方法 ( 監(jiān)測染色體帶型 ):C 帶 ,G 帶 ;
(6) 分子生物學(xué)方法 ( 監(jiān)測 DNA)zRFLP,STR,RAPD,SNP,DNA 指紋等。
這些方法都是直接或間接檢測動(dòng)物體內(nèi)某些基因的變化 , 但僅是其中很少一部分 , 不能反 映遺傳組成全貌 , 但由于檢測內(nèi)容不同 , 各種方法可以相互補(bǔ)充。我國自 1994 年發(fā)布第一個(gè) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn) , 其中國標(biāo) GB14927 規(guī)定了遺傳檢測的生化標(biāo)記檢測法和免疫標(biāo)記檢測法 , 這也是國際上常用的方法。雖然該標(biāo)準(zhǔn)在 2001 年進(jìn)行了修訂 , 只是對個(gè)別位點(diǎn)做了調(diào)整 ,2008 年對生化標(biāo)記法又增加了小鼠的膚酶、大鼠的血紅蛋白和堿性磷酸酶 , 對免疫標(biāo)記檢測法增加 了微量細(xì)胞毒檢測方法 , 使遺‘傳檢測技術(shù)更加科學(xué)完善。具體操作方法詳見國家標(biāo)準(zhǔn)GB14927.1 和 GB14927.2 。
( 二 ) 遺傳質(zhì)量檢測要求
1. 近交系動(dòng)物的遺傳質(zhì)量
近交系動(dòng)物必須符合以下要求 :
(1) 具有明確的品系背景資料 , 包括品系名稱、近交代數(shù)、遺傳組成、主要生物學(xué)特性等 , 并能充分表明新培育的或引種的近交系動(dòng)物符合近交系定義的規(guī)定。
(2) 用于近交系保種及生產(chǎn)的繁殖系譜及記錄卡應(yīng)清楚完整 , 繁殖方法科學(xué)合理。
(3) 經(jīng)遺傳檢測 ( 生化標(biāo)記基因檢測法 , 皮膚移植法 , 免疫標(biāo)記基因檢測法等 ) 質(zhì)量合格。
2. 封閉群動(dòng)物的遺傳質(zhì)量
由于封閉群動(dòng)物的遺傳組成不如近交系穩(wěn)定 , 目前尚沒有統(tǒng)一的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) , 但基本要求
如下 :
(1) 作為繁殖用原種的封閉群動(dòng)物必須遺傳背景明確 , 來源清楚 , 有較完整的資料 ( 包括種群名稱、來源、遺傳基因特點(diǎn)及主要生物學(xué)特性等 ) 。
(2) 保持封閉群條件 , 無選擇 , 以非近親交配方式進(jìn)行繁殖 , 每代近交系數(shù)上升不超過 1% 。
(3) 具有一定的種群規(guī)模 , 保持封閉群的主要生物學(xué)特性。
( 三 ) 遺傳監(jiān)測制度的實(shí)施
遺傳監(jiān)測是定期對動(dòng)物品系進(jìn)行遺傳檢測的一種質(zhì)量管理制度 , 其依據(jù)是遺傳質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) ,檢測方法為生化標(biāo)記檢測法和免疫標(biāo)記檢測法。近交系動(dòng)物每年至少檢測一次 , 封閉群動(dòng)物 也應(yīng)定期進(jìn)行檢測 , 具體實(shí)施要求見 GB14923 。遺傳監(jiān)測制度作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量控制的根本 制度 , 須嚴(yán)格執(zhí)行。只有實(shí)施定期檢測 , 才能確保動(dòng)物遺傳質(zhì)量符合要求 , 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果科學(xué)、 可靠。否則動(dòng)物遺傳特性的改變 , 可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)的變化和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的不可靠 , 影響實(shí)驗(yàn)研 究結(jié)果的可信度。
( 一 ) 遺傳監(jiān)測的主要方法
從理論上講 , 凡是由遺傳決定的動(dòng)物性狀都可能成為遺傳監(jiān)測的指標(biāo)。但是考慮到性狀的穩(wěn)定性以及監(jiān)測方法的準(zhǔn)確和方便 , 研究者逐漸建立了一些遺傳監(jiān)測的常規(guī)方法。因?yàn)槊?種方法只涉及到基因組內(nèi)有限的一部分位點(diǎn) , 所以需要幾種方法同時(shí)使用 , 才能對品系的遺傳組成有全面地了解。常用的方法有 :
(1) 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 ( 監(jiān)測生長發(fā)育、繁殖性狀參數(shù)等 ): 體重 , 體長 , 窩產(chǎn)仔數(shù) , 離乳數(shù)等 ;
(2) 免疫學(xué)方法 ( 監(jiān)測免疫標(biāo)志 ): 皮膚移植法 , 混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)法 , 腫瘤移植法 , 血清反應(yīng)法等 ;
(3) 生物化學(xué)方法 ( 監(jiān)測生化標(biāo)記 ): 通過電泳檢測各種同工酶如脂酶、過氧化氫酶等生化標(biāo)記 ;
(4) 形態(tài)學(xué)方法 ( 監(jiān)測外形特征 ): 毛色基因測試法 , 下領(lǐng)骨測定法等 ;
(5) 細(xì)胞遺傳學(xué)方法 ( 監(jiān)測染色體帶型 ):C 帶 ,G 帶 ;
(6) 分子生物學(xué)方法 ( 監(jiān)測 DNA)zRFLP,STR,RAPD,SNP,DNA 指紋等。
這些方法都是直接或間接檢測動(dòng)物體內(nèi)某些基因的變化 , 但僅是其中很少一部分 , 不能反 映遺傳組成全貌 , 但由于檢測內(nèi)容不同 , 各種方法可以相互補(bǔ)充。我國自 1994 年發(fā)布第一個(gè) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn) , 其中國標(biāo) GB14927 規(guī)定了遺傳檢測的生化標(biāo)記檢測法和免疫標(biāo)記檢測法 , 這也是國際上常用的方法。雖然該標(biāo)準(zhǔn)在 2001 年進(jìn)行了修訂 , 只是對個(gè)別位點(diǎn)做了調(diào)整 ,2008 年對生化標(biāo)記法又增加了小鼠的膚酶、大鼠的血紅蛋白和堿性磷酸酶 , 對免疫標(biāo)記檢測法增加 了微量細(xì)胞毒檢測方法 , 使遺‘傳檢測技術(shù)更加科學(xué)完善。具體操作方法詳見國家標(biāo)準(zhǔn)GB14927.1 和 GB14927.2 。
( 二 ) 遺傳質(zhì)量檢測要求
1. 近交系動(dòng)物的遺傳質(zhì)量
近交系動(dòng)物必須符合以下要求 :
(1) 具有明確的品系背景資料 , 包括品系名稱、近交代數(shù)、遺傳組成、主要生物學(xué)特性等 , 并能充分表明新培育的或引種的近交系動(dòng)物符合近交系定義的規(guī)定。
(2) 用于近交系保種及生產(chǎn)的繁殖系譜及記錄卡應(yīng)清楚完整 , 繁殖方法科學(xué)合理。
(3) 經(jīng)遺傳檢測 ( 生化標(biāo)記基因檢測法 , 皮膚移植法 , 免疫標(biāo)記基因檢測法等 ) 質(zhì)量合格。
2. 封閉群動(dòng)物的遺傳質(zhì)量
由于封閉群動(dòng)物的遺傳組成不如近交系穩(wěn)定 , 目前尚沒有統(tǒng)一的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) , 但基本要求
如下 :
(1) 作為繁殖用原種的封閉群動(dòng)物必須遺傳背景明確 , 來源清楚 , 有較完整的資料 ( 包括種群名稱、來源、遺傳基因特點(diǎn)及主要生物學(xué)特性等 ) 。
(2) 保持封閉群條件 , 無選擇 , 以非近親交配方式進(jìn)行繁殖 , 每代近交系數(shù)上升不超過 1% 。
(3) 具有一定的種群規(guī)模 , 保持封閉群的主要生物學(xué)特性。
( 三 ) 遺傳監(jiān)測制度的實(shí)施
遺傳監(jiān)測是定期對動(dòng)物品系進(jìn)行遺傳檢測的一種質(zhì)量管理制度 , 其依據(jù)是遺傳質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) ,檢測方法為生化標(biāo)記檢測法和免疫標(biāo)記檢測法。近交系動(dòng)物每年至少檢測一次 , 封閉群動(dòng)物 也應(yīng)定期進(jìn)行檢測 , 具體實(shí)施要求見 GB14923 。遺傳監(jiān)測制度作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量控制的根本 制度 , 須嚴(yán)格執(zhí)行。只有實(shí)施定期檢測 , 才能確保動(dòng)物遺傳質(zhì)量符合要求 , 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果科學(xué)、 可靠。否則動(dòng)物遺傳特性的改變 , 可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)的變化和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的不可靠 , 影響實(shí)驗(yàn)研 究結(jié)果的可信度。
