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實驗動物微生物及寄生蟲控制與監(jiān)測

來源:山東動物實驗發(fā)布時間:2015-01-27 09:14:18

<一>實施微生物和寄生蟲控制的意義
實驗動物攜帶的微生物及寄生蟲有嚴格的控制,尤其是可引起實驗動物爆發(fā)烈性傳染性疾病的病原微生物,及引發(fā)嚴重侵襲病的寄生蟲。即使是一般性的病原微生物和寄生蟲的攜帶,都必須嚴格控制。目的是保證實驗動物的品質(zhì),防止出現(xiàn):
動物及實驗的損失,一些疾病,如鼠痘、犬細小病毒出血性腸炎、兔球蟲病等會導致動物大批量的死亡,動物群體的健康素質(zhì)下降,正在進行的科學實驗被迫中止,造成難以計算的經(jīng)濟損失;
威脅人類健康,實驗動物的疾病,有許多是人獸共患的傳染性疾病,有很多情況是動物僅呈隱性感染,或僅成為病原攜帶者,對飼養(yǎng)和動物實驗人員潛伏著巨大的危害,并可能造成烈性傳染病大規(guī)模的擴散。
影響實驗結(jié)果,實驗動物的微生物和寄生蟲感染會不同程度地影響動物實驗的結(jié)果,從而影響實驗數(shù)據(jù)的準確性和可靠性,甚至會推導出錯誤的結(jié)論。
實驗動物微生物和寄生蟲控制的等級
普通動物
這是微生物和寄生蟲控制要求最低的實驗動物。要求動物不攜帶主要的人獸共患病、自身的烈性傳染病的病原體及體外寄生。普通級小鼠,要求排除2種細菌、3種病毒、2類寄生蟲;普通級大鼠必須排除2種細菌、1種病毒、2類寄生蟲,實驗動物國家標準有詳細的規(guī)定。
普通級實驗動物一般是在開放環(huán)境下飼養(yǎng),要達到上述要求,也應在飼養(yǎng)管理中采取一系列相應的措施,包括建立消毒防疫制度、建立并遵守動物房操作規(guī)程等。動物飼養(yǎng)和實驗設(shè)施要符合最基本的要求。目前,這個級別的動物,一般僅供作教學、或預備實驗時使用。
清潔級動物
這是根據(jù)我國實驗動物發(fā)展需要而設(shè)立的一個比普通動物要求高的微生物及寄生蟲控制等級。要求動物不帶有一些傳染病的病原微生物,及常見的體內(nèi)寄生蟲,如:清潔級小鼠,要排除8種細菌、5種病毒、7類寄生蟲;清潔級大鼠,不應攜帶8種細菌、2種病毒、7類寄生蟲,實驗動物國家標準有具體的規(guī)定。
清潔級動物的引種應來源于更高等級的動物,應在溫、濕度可控的亞屏障系統(tǒng)中,進行飼養(yǎng)、繁殖生產(chǎn)或使用。所使用的籠具、墊料、器具、飼料和飲水等,應當實行滅菌處理,動物設(shè)施應分區(qū)域設(shè)置,設(shè)計應符合人流、物流防止交叉感染和方便工作的原則,要建立嚴格管理制度和操作規(guī)范。清潔級動物已是我國目前主要使用的質(zhì)量控制等級的動物,已被廣泛地應用于生命科學研究、新藥研制和安全評價等領(lǐng)域的動物實驗之中,發(fā)揮了清潔級動物,易于質(zhì)量控制,非實驗因素干擾少,有較好的敏感性和可重復性的優(yōu)點。
無特定病原體動物
指在清潔級動物的基礎(chǔ)上,根據(jù)實驗需要,要求動物不攜帶可能干擾實驗的進行或結(jié)果的特定微生物和寄生蟲,這類實驗動物稱之為無特定病原體動物。其微生物和寄生蟲的控制標準,國家技術(shù)監(jiān)督部門有明確的規(guī)定。通常是用其英文縮寫,稱為SPF動物。
SPF動物的種群來源于無菌剖腹產(chǎn)動物,在屏障系統(tǒng)中進行保種、飼育及使用,按國家標準,嚴格實施微生物和寄生蟲控制。動物的繁殖、生產(chǎn)和動物實驗等設(shè)施,要嚴格按規(guī)范要求建設(shè)和管理,并應進行經(jīng)常性的質(zhì)量監(jiān)測。質(zhì)量等級越高的動物,其繁殖、生產(chǎn)的成本就會越高,稍有疏忽,造成的損失就會越大。從事繁殖、生產(chǎn)和動物實驗的人員,應當接受實驗動物學的專門培訓。SPF動物廣泛地應用于腫瘤免疫學、病理學、藥物學、毒理學、生物制品的研制及生物醫(yī)學等方面,尤其在放射、燒傷等醫(yī)學研究領(lǐng)域具有特殊的應用價值。目前,SPF動物已是國際公認的標準的實驗動物,我國的使用量也正在不斷地增加。
無菌動物和悉生動物
無菌動物是要求動物不攜帶任何以現(xiàn)有手段可檢出的微生物和寄生蟲,其來源是由普通動物經(jīng)無菌剖腹產(chǎn)手術(shù),幼仔置于無菌隔離器中,由人工哺乳或由其他無菌動物代乳飼育而成。在無菌動物中人為地植入已知的一種或數(shù)種微生物的動物被稱為悉生動物。
無菌動物和悉生動物都應置于無菌隔離裝置中保育,飼養(yǎng)管理嚴格按照無菌條件處理,國家對這一等級的動物質(zhì)量也有明確的標準。無菌動物和悉生動物主要是用在生物醫(yī)學的研究領(lǐng)域,如:老年病、腫瘤、心血管病、人類疾病動物模型、免疫、病理和毒理、傳染病、宇航醫(yī)學等方面的研究。
<二>實驗動物的微生物和寄生蟲監(jiān)測
實驗動物的微生物和寄生蟲控制的水平,是其質(zhì)量高低及標準化程度的重要標志。要保證實驗動物的微生物和寄生蟲控制的質(zhì)量,必須對動物進行有一定程序的、定期的檢測。除了由實驗動物單位,自行的監(jiān)控之外,還應由具有第三方公證地位的質(zhì)量監(jiān)督機構(gòu),以國家有關(guān)部門頒布的標準為準繩,采用國際公認的技術(shù)、方法,予以定期的監(jiān)測和確認。
監(jiān)測技術(shù)
微生物監(jiān)測
根據(jù)動物微生物和寄生蟲控制等級的標準要求,采用病理學技術(shù),微生物的分離、培養(yǎng)、鑒定技術(shù),免疫血清學技術(shù)等。對目標微生物的檢測,不能只采用某個單一方法,應選用上述各種技術(shù)中,敏感性和精確度高、成熟和公認的方法,從病理、微生物、免疫血清學等方面綜合評判。
寄生蟲監(jiān)測
包括體外和體內(nèi)寄生蟲的檢測,普通級動物主要檢查體外寄生蟲,更高等級,則按該等級標準要求進行體外和體內(nèi)寄生蟲種類的檢定。采用皮膚和被毛檢查、病理解剖、腸道寄生蟲和血液原蟲的顯微鏡檢查等,以發(fā)現(xiàn)蟲體、蟲卵和主要特征性病理變化為判別依據(jù)。
監(jiān)測程序
取樣原則。根據(jù)受檢動物群體數(shù)量的大小,按國家標準規(guī)定的要求,確定取樣數(shù);隨機抽樣,避免人為誤差;檢查抗體的取樣應側(cè)重老齡動物,病原體分離應選幼齡動物,盡量提高陽性檢出率;為確保檢測結(jié)果的可靠性,屏障系統(tǒng)動物取樣應多于開放系統(tǒng)的動物。 檢測時間和頻率的確定。在正常情況下,應每半年檢測一次;動物群體中,有個體動物出現(xiàn)異常,懷疑有感染存在時,應盡快檢測,以查明原因,及時采取措施。