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實(shí)驗(yàn)技術(shù):樹鼩手足口病模型的建立

來源:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物醫(yī)學(xué)發(fā)布時間:2014-12-24 13:18:19

柯薩基病毒A16(CA16)通常認(rèn)為是人類手足口病的主要病原體之一。手足口病的臨床表現(xiàn)包括幼兒手、足、口小囊泡和嚴(yán)重的炎癥性的中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害。在該項(xiàng)研究中,利用實(shí)驗(yàn)CA16感染樹鼩來研究CA16的發(fā)病機(jī)制。
實(shí)驗(yàn)動物:15只健康雌性樹鼩(80+10g,2月齡)隨機(jī)分成感染組(n=12)及模擬感染對照組(n=3).所有實(shí)驗(yàn)規(guī)程都通過云南省實(shí)驗(yàn)動物管理辦公室批準(zhǔn),所有動物都根據(jù)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物醫(yī)學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)動物委員會(CMAS)的方針政策單獨(dú)飼養(yǎng)。所有個體在此之前都通過中和試驗(yàn)證明沒有CA16抗體。
實(shí)驗(yàn)方法:實(shí)驗(yàn)組樹鼩通過鼻腔噴霧由呼吸道感染CA16(104.5 CCID50),對照組使用生理鹽水噴霧模擬,為未感染的陰性對照。每天監(jiān)測樹鼩,并在感染后的2天通過數(shù)字溫度計(jì)棒(MCBOMR,歐姆龍公司)測量直腸體溫,同時,取EDTA包被的毛細(xì)管靜脈血樣品作日常常規(guī)的生物對病毒載量檢測(獸醫(yī)多物種血液系統(tǒng),Hemavet950FS,德魯科技有限公司),所有組織和器官的病原學(xué)及組織病理學(xué)檢測在樹鼩被麻醉處死的第4、7、10和14天進(jìn)行。
結(jié)果表明,被CA16感染的樹鼩體溫以及血嗜中性粒細(xì)胞與單核細(xì)胞的百分比在感染后4—7天均升高,不同組織和糞便的CA16動態(tài)分布在各個感染階段都能找到,不僅如此,還能觀察到中樞神經(jīng)系統(tǒng)和其他器官的病理病變。該項(xiàng)研究表明樹鼩能夠作為研究CA16感染的良好的動物模型。